Epidemiologia molecular dos vírus zika, chikungunya e dengue na cidade de Juazeiro do Norte, Ceará
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As arboviroses constituem doenças virais, transmitidas ao ser humano por insetos vetores infectados com espécies de arbovírus. Nos últimos anos, tem ocorrido uma elevada incidência de Dengue, Zika e Chikungunya no Nordeste brasileiro. Dessa forma, este estudo visa avaliar através da Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real (RT-qPCR) 182 amostras de plasmas previamente analisadas por ELISA de indivíduos sintomáticos para possível constatação de co-circulação de ZIKV e CHIKV com DENV, e, traçar o perfil clínico e epidemiológico dos mesmos. Trata-se de um estudo transversal e observacional realizado no LACEN, Juazeiro do Norte – CE, no surto de arboviroses ocorrido no ano de 2016. Os dados clínico e epidemiológico foram obtidos através de consulta ao sistema GAL do LACEN. Para realização do ELISA, 182 amostras foram testadas para DENV utilizando o Kit Serion ELISA Classic apenas para DENV IgM. Destas, apenas 125 plasmas foram analisados para CHIKV, utilizando o Kit Anti-CHIKV ELISA Euroimmun com pesquisa de IgM e IgG. As referidas amostras foram submetidas a RT-qPCR, para detecção de ZIKV, CHIKV e DENV. O RNA foi extraído utilizando um mini kit QIAamp Viral RNA, cDNA foi sintetizado utilizando reagentes Superscript III reverse transcriptase. E, as amostras foram testadas com uso de probes hidrolisáveis para ZIKV, CHIKV e DENV e pelo ZDC Multiplex RT-qPCR. As reações correram em duplicatas em RTqPCR, utilizando controles positivos, negativos e controle interno. Os dados clínicos e epidemiológicos foram analisados utilizando o X2 – Teste de hipótese de Qui- Quadrado com intervalo de confiança de p value = 0,05. A pesquisa foi aprovada com protocolo CAAE nº 57865416.4.0000.5505. Das 182 amostras, a maioria (72%) foram do gênero feminino, sendo a média de idade dos infectados para ambos os sexos de 40,2 ± 17,7 anos. Em relação ao diagnóstico sorológico ELISA, ocorreu contaminação por CHIKV e DENV, sendo predominante a infecção por CHIKV com 79 (63,2%) dos participantes reagentes ao arbovírus, enquanto que para DENV, a ocorrência foi de apenas 9 (4,9%) casos. Contudo, quando as amostras foram submetidas à análise por RT-qPCR verificou-se que em 35 (19,2%) foi identificado a presença de ZIKV e em apenas 7 (3,8%) foi detectado CHIKV, não ocorrendo positividade ao DENV. Em relação à caracterização sintomática dos indivíduos, 9 (nove) sintomas foram identificados: febre, cefaleia, dor retro-orbital, mialgia, exantema, artragia, prurido, náuseas e diarreia, sendo: febre (40,7%), cefaleia (37,9%), mialgia (37,9%) e dor retro-orbital (30,2%), os mais prevalentes com proporções similares entre os gêneros masculino e feminino, não observando diferenças estatisticamente significativas (p > 0,05). Constata-se esta ocorrência principalmente nas gestantes. Destas, 33,3% (5 de 15) foram positivas para ZIKV por RT-qPCR, com maior ocorrência no terceiro trimestre gestacional (60%; 3 de 5), seguido por 20% (1 de 5) de infecção no primeiro e segundo trimestre. A variabilidade de métodos de diagnóstico laboratorial torna-se essencial para confirmação precisa de cada arbovírus. Assim, o ELISA não deve se constituir como única e principal ferramenta de análise, pois as amostras ao serem analisadas pela técnica de RTq-PCR apresentaram uma consider positividade para infecção por ZIKV, o que pode ter contribuído para subnotificações no Estado do Ceará, principalmente, de possíveis casos de microcefalia em neonatos de gestantes presentes na amostra, que só foram ZIKV positivas pela RT-qPCR.
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